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生長分化因子15(GDF15)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法,小樣本)

Mini Samples ELISA Kit for Growth Differentiation Factor 15 (GDF15)

PDF; MIC1; NAG-1; PLAB; PTGFB; Macrophage inhibitory cytokine 1; NSAID-activated gene 1 protein; Placental bone morphogenetic protein; Prostate differentiation factor

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  • 生長分化因子15(GDF15)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法,小樣本) 實驗結果圖
  • MEC034Mu.jpg 標準曲線圖
  • Certificate 通過ISO 9001、ISO 13485質量體系認證

特異性

本試劑盒用于檢測生長分化因子15(GDF15)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法,小樣本),經(jīng)檢測與其它相似物質無明顯交叉反應。
由于受到技術及樣本來源的限制,不可能完成對所有相關或相似物質交叉反應檢測,因此本試劑盒有可能與未經(jīng)檢測的其它物質有交叉反應。

回收率

分別于定值血清及血漿樣本中加入一定量的生長分化因子15(GDF15)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法,小樣本)(加標樣品),重復測定并計算其均值,回收率為測定值與理論值的比率。

樣本 回收率范圍(%) 平均回收率(%)
serum(n=5) 81-105 94
EDTA plasma(n=5) 95-102 98
heparin plasma(n=5) 88-95 92

精密度

精密度用樣品測定值的變異系數(shù)CV表示。CV(%) = SD/mean×100
批內差:取同批次試劑盒對低、中、高值定值樣本進行定量檢測,每份樣本連續(xù)測定20 次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批間差:選取3個不同批次的試劑盒分別對低、中、高值定值樣本進行定量測定,每個樣本使用同一試劑盒重復測定8次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批內差: CV<10%
批間差: CV<12%

線性

在定值血清及血漿樣本內加入適量的生長分化因子15(GDF15)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法,小樣本),并倍比稀釋成1:2,1:4,1:8,1:16的待測樣本,線性范圍即為稀釋后樣本中生長分化因子15(GDF15)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法,小樣本)含量的測定值與理論值的比率。

樣本 1:2 1:4 1:8 1:16
serum(n=5) 83-96% 88-97% 89-99% 85-92%
EDTA plasma(n=5) 79-91% 80-95% 81-98% 96-105%
heparin plasma(n=5) 85-102% 79-101% 94-104% 86-94%

穩(wěn)定性

經(jīng)測定,試劑盒在有效期內按推薦溫度保存,其活性降低率小于5%。
為減小外部因素對試劑盒破壞前后檢測值的影響,實驗室的環(huán)境條件需盡量保持一致,尤其是實驗室內溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實驗員來進行操作可減少人為誤差。

實驗流程

1. 實驗前標準品、試劑及樣本的準備;
2. 加樣(標準品及樣本)25µL,37°C溫育1小時;
3. 吸棄,加檢測溶液A25µL,37°C孵育1小時;
4. 洗板3次;
5. 加檢測溶液B25µL,37°C孵育30分鐘;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物25µL,37°C孵育10-20分鐘;
8. 加終止液20µL,立即450nm讀數(shù)。

實驗原理

將生長分化因子15(GDF15)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法,小樣本)抗體包被于96孔微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入標準品或標本,其中的生長分化因子15(GDF15)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法,小樣本)與連接于固相載體上的抗體結合,然后加入生物素化的生長分化因子15(GDF15)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法,小樣本)抗體,將未結合的生物素化抗體洗凈后,加入HRP標記的親和素,再次徹底洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的生長分化因子15(GDF15)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法,小樣本)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(O.D.值),計算樣品濃度。

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參考文獻

雜志 參考文獻
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J Inflamm Res Changes in Plasma Growth Differentiation Factor-15 After Laparoscopic Sleeve Gastrectomy in Morbidly Obese Patients: A Prospective Study [33880052]
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Nat Metab Small extracellular vesicle-mediated targeting of hypothalamic AMPKα1 corrects obesity through BAT activation [34675439]
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Surgical Endoscopy The effect of bariatric surgery on the expression of Growth Differentiation Factor-15/Macrophage-Inhibitory Cytokine-1 (GDF-15/MIC-1) in rat [Pubmed:35029766]
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